制备抗体,首先需要有质量好的抗原,还要选择适当的免疫途径,才能产生特异性强和效价高的抗体。作免疫用的动物有哺乳类和禽类,主要为羊、马、家兔、猴、猪、豚鼠、鸡等,实验室常用者为家兔、山羊和豚鼠等。动物种类的选择主要根据抗原的生物学特性和所要获得抗血清数量,如一般制备抗r-免疫球蛋白抗血清,多用家兔和山羊,因动物反应良好,而且能够提供足够数量的血清,用于免疫的动物应适龄,健壮,无感染性疾患,比较好为///雄性,此外还需十分注意动物的饲养,以消除动物的个体差异以及在免疫过程中死亡的影响。若用兔,最好用纯种新西兰兔,一组三只,兔的体重以2~3kg为宜。免疫途径有静脉内、腹腔内、肌肉内、皮内、皮下、淋巴结...
抗GST标签抗体,GST即谷胱甘肽-S-转移酶,可将谷胱甘肽中的硫基转移至含硝基或卤化物的复合物中。其天然大小为26KD。GST标签体系具有蛋白表达产率高、表达产物纯化方便的特点。且GST融合蛋白在水溶液中可溶,可从细菌裂解液中提取,在不变性的条件下通过亲和层析得到。GST融合蛋白可被位点特异性蛋白酶裂解,从而除去GST蛋白。融合蛋白又是一个非常好的强免疫原,因此,很容易制备抗新蛋白的抗体。近年来在原核表达体系中,谷胱甘肽S转移酶GST表达纯化系统的应用更为普遍。比较好用的国产抗体有哪些?上海lifespan抗体代理TIGIT和TIM-3是新晋热门免疫检查点。TIGIT是含Ig及ITIM结构域...
细胞铁死亡(ferroptosis)是铁依赖的新型细胞程序性死亡。细胞内铁离子与脂肪酸作用产生脂质活性氧,当胞内的谷胱甘肽(GSH)抗氧化系统无法及时解毒,就会导致细胞死亡,此为铁死亡。铁死亡在许多疾病的药物研发显示出巨大的潜力。arigo推出的铁死亡(ferroptosis)抗体组合包,可加速相关研究。该抗体组合包包含关键Caspase1抗体,GSDMD抗体,IL1beta抗体,betaTubulin抗体,可认pro-及cleaved两型蛋白,适用人类,小鼠,大鼠样本。arigo的铁死亡抗体组合包被用于验证铁死亡的发生与缓和,并发表在国际科学期刊MarineDrugs(PMID:348224...
标签抗体,能够高度特异性识别通过重组技术构建的融合蛋白上特殊表位的抗体。科研人员可以通过DNA重组技术,构建包含目的基因以及表位标记的融合蛋白,进而通过特异性标签抗体对其鉴定与纯化,以达到研究的需求。常用的表位标签有His、HA、Myc和GST等。这些表位标签通常不会影响目的蛋白的生物活性和细胞内定位。义翘神州自主研发了10种抗原标签抗体,包括HA标签抗体、Myc标签抗体、DYKDDDDK标签抗体、GFP标签抗体和V5标签抗体等。标签抗体的特点:纯化方便,一般通过一步纯化就可以获得纯度和质量比较好的融合蛋白;标签对目的蛋白的三维结构或是生物学活性影响很小;标签易于切除;纯化过程中可以对目的蛋白...
抗GST标签抗体,GST即谷胱甘肽-S-转移酶,可将谷胱甘肽中的硫基转移至含硝基或卤化物的复合物中。其天然大小为26KD。GST标签体系具有蛋白表达产率高、表达产物纯化方便的特点。且GST融合蛋白在水溶液中可溶,可从细菌裂解液中提取,在不变性的条件下通过亲和层析得到。GST融合蛋白可被位点特异性蛋白酶裂解,从而除去GST蛋白。融合蛋白又是一个非常好的强免疫原,因此,很容易制备抗新蛋白的抗体。近年来在原核表达体系中,谷胱甘肽S转移酶GST表达纯化系统的应用更为普遍。兔单克隆抗体的定制开发。Antigenix抗体双特异性抗体是含有2种特异性抗原结合位点的人工抗体,能在靶细胞和功能分子(细胞)之间架...
抗体制备失败的可能原因及应采取的措施:(1)免疫动物的种属及品系是否合适,可考虑改变动物的种属或品系,或扩大免疫动物的数量。(2)抗原质量是否良好,可改用其它厂家的产品或改用同一厂家的其它批号,也可考虑改变抗原分子的部分结构,或改进提取方法。(3)制备的免疫原是否符合要求,可从偶联剂,载体、抗原或载体的比例、反应时间等多方面去考虑,并加以改进。(4)所用的佐剂是否合适,乳化是否完全,可改用其它佐剂,或加强乳化。(5)免疫的方法、剂量,加强免疫的间隔时间和次数,免疫的途径是否合适。(6)动物的饲养是否得当,如营养(饲料、饮水)、环境卫生(通风、采光、温度)是否符合要求等细胞标志物抗体有哪些?广东...
单克隆抗体是由单一B细胞克隆产生的高度均一、仅针对某一特定抗原表位的抗体。通常采用杂交瘤技术来制备,杂交瘤(hybridoma)抗体技术是在细胞融合技术的基础上,将具有分泌特异性抗体能力的致敏B细胞和具有无限繁殖能力的骨髓瘤细胞融合为B细胞杂交瘤。用具备这种特性的单个杂交瘤细胞培养成细胞群,可制备针对一种抗原表位的特异性抗体,即单克隆抗体。单克隆抗体优点:纯度高,灵敏度高,特异性强,交叉反应少,制备的成本低。缺点:对技术有一定的要求,而且通过抗原的化学处理很容易丢失表位。寻找进口抗体的平替产品。安徽Bethyl抗体代理根据发表在《NatureCancer》杂志上的研究结果,这些细胞向自身周围环...
12月17日的《Neuron》杂志上,分析了自闭症和癫痫患者以及小鼠模型中的脑脊液,发现了一种重要的大脑蛋白质,它能使过度活跃的脑细胞安静下来,这种蛋白质在自闭症儿童中处于异常低的水平。CNTNAP2抗体。这种名为CNTNAP2的蛋白质被恰当地称为“catnap2”,是脑细胞过度活跃时产生的。抗体。自闭症和癫痫患儿的大脑中没有足够的CNTNAP2,他们的大脑无法平静下来,从而导致癫痫发作。当脑细胞因过度刺激而过于活跃时,它们会产生更多的CNTNAP2,而CNTNAP2会漂走,并与其他脑细胞结合,使它们安静下来。这种蛋白质还会泄漏到脑脊液中,科学家们可以在那里测量它。如何进行单克隆抗体效价测定?...
CD30,较初称为Ki-1,由Stein等人发现。作为经典霍奇金淋巴瘤(cHL)的Reed-Sternberg细胞特异性标志物。由于正常样本中,CD30的表达仅限于正常组织中少量活化的造血细胞,因此CD30可能是cHL和ALCL的有效诊治靶点。Brentuximabvedotin(BV),一种CD30靶向的抗体偶联药物,在难治性或复发性(R/R)cHL7的II期临床试验中显示出单次治疗后的高疗效,客观缓解率(ORR)为72%,而在ALCL中的ORR为86%,从而获得全球批准,包括FDA(美国)和PMDA(日本)。MorihiroHigashi等人使用相同的抗CD30抗体(Her-H2)克隆,比...
PD-L1/4-1BB双特异性抗体,正在开发用于***多种**。PD-L1/4-1BB双特异性抗体旨在阻断免疫抑制性PD-1/PD-L1的结合并诱导4-1BB刺激,从而激活抗肿瘤免疫效应物,由此增强抗肿瘤活性以及安全性。4-1BB于1989年被鉴定为一种诱导基因,在抗原启动的T细胞上表达,而在静止的T细胞上不表达。4-1BB(CD137)又名肿瘤坏死因子超家族受体9,是I型跨膜糖蛋白,属于肿瘤坏死因子受体(TNFR)超家族成员,由信号肽、胞外区、疏水区及胞内区构成,以单体或二聚体形式表达于活化的T细胞表面。4-1BB主要表达于CD4+T、CD8+T表面,也可表达于NK细胞,由于抗4-1BB抗体...
PD-L1/4-1BB双特异性抗体,正在开发用于***多种**。PD-L1/4-1BB双特异性抗体旨在阻断免疫抑制性PD-1/PD-L1的结合并诱导4-1BB刺激,从而激活抗肿瘤免疫效应物,由此增强抗肿瘤活性以及安全性。4-1BB于1989年被鉴定为一种诱导基因,在抗原启动的T细胞上表达,而在静止的T细胞上不表达。4-1BB(CD137)又名肿瘤坏死因子超家族受体9,是I型跨膜糖蛋白,属于肿瘤坏死因子受体(TNFR)超家族成员,由信号肽、胞外区、疏水区及胞内区构成,以单体或二聚体形式表达于活化的T细胞表面。4-1BB主要表达于CD4+T、CD8+T表面,也可表达于NK细胞,由于抗4-1BB抗体...